分析方法 · 基础教学
MOTS-c 多了约 16 Da:一步步理解氧化信号
先找到 MOTS-c 的两个甲硫氨酸,再看加一个氧会怎样改变质量。
MOTS-c 的质量比预期多了大约 16 Da,是不是氧化了?这是值得检查的一种可能,但还不能直接下结论。先找到序列中的甲硫氨酸,再分清图上说的是分子质量还是 m/z,才能读懂这个“16”。
先把两个 M 找出来
常见 MOTS-c 参考序列是 MRWQEMGYIFYPRKLR。M 代表甲硫氨酸。从开头数,两个 M 分别在第 1 和第 6 位。
检查具体样品时,仍要使用所供材料实际的序列和端基。参考序列帮助理解,但不能代替产品的具体规格。

为什么加一个氧,会多约 16 Da?
按 Unimod 氧化记录的单同位素质量计算,增加一个氧原子,质量增加 15.994915 Da;增加两个氧则是 31.989830 Da。口头上常简写成“多 16”和“多 32”。
整数说法方便记忆,准确比较时还是要用相应的精确值,并确认比较的是同一种分子形式。

图上的峰,为什么可能只移动约 8?
如果比较的是对应的双电荷离子,质量差还要除以 2。增加一个氧,m/z 移动约 7.99746;增加两个氧,m/z 移动约 15.99492。
所以,只说“峰多了 16”,却不说是分子质量还是 m/z、几电荷,就可能把一个氧和两个氧混淆。

总质量能告诉你是哪一个 M 变化了吗?
仅靠总质量不能。第 1 位或第 6 位甲硫氨酸分别发生一次氧化,都可能得到相同的一个氧质量增量。需要结合合适的碎片数据、色谱比较等,继续检查位置和其它可能解释。
这张图也不能单独告诉你变化发生在什么时候。保存和处理记录,要与检测数据一起看。
换成三电荷,会移动多少?
不要直接把峰强度当成氧化后的重量比例。要测比例,需要合适的定量方法。
查看答案
15.994915 ÷ 3 ≈ 5.33164。这个差值仍不能单独确定变化发生在哪个位置。
询问 MOTS-c 时,把问题问具体
询问 MOTS-c 时,先确认实际序列和端基,再了解有哪些身份或稳定性相关资料。如果看到疑似氧化信号,可以把完整图谱与样品处理记录一并交给实验室核对。本文的算式不能用于推算某批产品的氧化比例或保质期。
