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计算依据

方法和源记录

这些链接记录了计算约定或实验室背景。他们不会验证目录批次或取代受控实验室方法。

  1. 01

    检测指导手册

    NCATS/NIH 测定指导手册。用于测定开发、缩放和微量滴定板格式的实验室环境;页面规划器仅执行算术运算。

    技术来源
  2. 02

    NIST SI 指南,章节 8

    国家标准与技术研究所。规划者使用的单位和数量约定。

    技术来源

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每孔都要同样多的溶剂,稀释表该怎么排?

细胞实验里,想比较的往往是肽浓度,而不是同时比较越来越多的溶剂。排稀释表时,把最终溶剂比例单列一栏,可以更早发现这个问题。

每孔都要同样多的溶剂,稀释表该怎么排?
编辑漫画,用于解释主题;不是实验照片。

先确定每孔的最终状态

写清每孔总量、目标肽浓度和最终溶剂组成。母液中DMSO很高,并不等于每孔最终比例也很高;反过来,少量高浓度溶剂带入后,也可能影响系统。计算应依据所有加入体积,而不是只看某一步。

看一张假设板式

图中列出肽0、1、10 µM三种条件,DMSO最终比例都设为0.1%。这些是解释溶剂平衡的教学数字,不是KPV或LL-37的实验推荐,也不代表0.1%对所有细胞、酶和检测方法都安全。

配不同浓度,也要平衡溶剂
假设板式:各组最终DMSO均为0.1%。这个比例不是通用安全阈值,需按实验验证。
配不同浓度,也要平衡溶剂
条件DMSO最终比例
溶剂对照 · 肽0 µM0.1%
实验组 · 肽1 µM0.1%
实验组 · 肽10 µM0.1%

为什么不能只给高浓度组多加母液

如果高浓度组加入更多含DMSO母液,而其他组没有对应补足,肽浓度与DMSO比例就同时变化。即使读数出现差别,也难以区分来自哪一项。应按适用实验设计安排工作液和溶剂对照,让最终条件可比较。

用一个体积账检查比例

教学假设:每孔最终100 µL,加入10 µL工作液,工作液中DMSO为1%,其余加入液不含DMSO。则最终DMSO为10×1%÷100=0.1%。这是体积分数的简化计算,实际还需明确混合后的最终体积及各液体组成,不能照抄为所有体系的操作方案。

小数算得出,移液也要做得到

若计算要求的取样体积小于可靠移液范围,应重新设计工作液或稀释步骤,并按适用方法验证。不要把一个无法可靠取到的小数体积,直接写进排板表当作已经解决的问题。

在现有工具旁怎样使用这张表

先用工具规划浓度与体积,再另列每一步溶剂比例,逐组核对最终结果。本文新增的是溶剂平衡的说明与算例,不声称已经为工具新增自动平衡或导出功能。相关产品页用于查询材料身份与询价。

参考资料

论文结果、教学假设和材料资料分别标明;复现实验请阅读原始方法。

相关研究材料

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本页用于科研资料阅读与材料查询,不提供个人用药建议,也不替代具体批次的检测记录。