ペプチドの純度と含有量：10 mgバイアルに入っているものを計算する

バイアルには粉末が10 mg含まれていても、ペプチドは10 mg未満しか含まれていないことがあります。高いHPLCパーセンテージは、欠けている質量情報を補うものではありません。これを理解する最も簡単な方法は、三つの質問を分けて考えることです：粉末はどれだけか、ペプチドはどれだけか、そして特定のターゲットはどれだけか。

1。まずは秤量されたすべてから始めます

8.0 mgの総ペプチド物質、1.5 mgのカウンターイオン、0.5 mgの水から作られた教材用サンプルを想像してください。これらを合わせると10.0 mgになります。これらは質量収支のレッスン用に考案された区分と数量です。実際の分析では他の成分が含まれることがあります。

ラベルは、その数量が何を表すかを示していなければなりません。総粉末質量、正味ペプチド量、およびアッセイで調整された量は互換ではありません。数値だけから表示の基準を推測してはいけません。

2。三つのパーセントは三つの異なる問いに答えられます

HPLCの面積純度は、選択された検出器シグナルを比較します。総ペプチド含量は、報告された質量基準に対するペプチド物質を表します。ターゲットペプチドアッセイは、適切に校正された方法を用いて特定のターゲットを定量しようとします。濃度計算にどれを使うかを選ぶ前に、方法と定義を読んでください。

3。文書化された含量分画を用いて計算する

あくまで本示例に限り、適切な結果が、秤量したままの基準で総ペプチド含量80.0%を文書化していると仮定します。すると10 mg × 0.80 = 8 mgの総ペプチドとなります。この粉末を最終容量2 mLに調製した場合、4 mg/mLの総ペプチド物質が得られます。

10 mg × 0.80 ÷ 2 mL = 4 mg/mL

これは依然として、自動的に特定の標的の4 mg/mLになるわけではありません。総ペプチド含量には他のペプチド成分が含まれることがあります。Bachemは純ペプチド含量と純度を明確に区別しています。標的濃度を報告するには、その標的を実際に定量する証拠を使用してください。

4。なぜ利用可能なすべてのパーセンテージを掛け合わせないのか？

同じ試料が98%のHPLC面積純度も持つと仮定します。10 × 0.80 × 0.98を掛け合わせると、算術的には7.84 mgになりますが、質量の主張には検出器応答を組成に結び付ける仮定が必要です。正当化された方法と基準がなければ、最後の掛け算は測定された標的量ではありません。

また、結果が as-is、乾燥基準、その他の補正基準のいずれであるかも確認してください。乾燥基準の結果を、湿った、秤量したままの粉末に直接適用すると、別の誤差が生じる可能性があります。

5。同じ基準でロットを比較する

2つの架空のロットがそれぞれ 10 mg の重さであっても、文書化された as-is 総ペプチド含有量が 80% と 70% の場合、それぞれ 8 mg と 7 mg の総ペプチド物質を含みます。同じ粉末重量でも、同じ最終容量で同じペプチド濃度になるわけではありません。

6。実際に必要な量を確認する

実験に必要なのが、総粉末質量、総ペプチド物質、または定量化されたターゲット量のいずれであるかを明記してください。結果の定義、分析方法、基準を確認してください。含有量の結果が得られない場合は、未検証のターゲット濃度を報告する代わりに、調製した溶液を公称粉末濃度として記述してください。

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以下のような材料については GHK-Cu、KPV、まず正確な形態、数量、研究上の疑問点を特定してください。次に、該当ロットについて利用可能な記録を尋ねてください。製品名が一致していても、異なる仕様が互換性を持つわけではありません。

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