تسرد وثيقة الببتيد الخاصة بك كتلة جزيئية قريبة من 2,000 Da، لكن الطيف يحتوي على قمة قريبة من 1,001. هل أرسل المورد المادة الخطأ؟ هذا الرقم وحده لا يمكنه الإجابة عن السؤال. يقيس مطياف الكتلة الكتلة مقسومة على الشحنة، ويُكتب عادةً m/z.
يمكن لجزيء واحد أن يحمل أكثر من شحنة واحدة
فكر في رقم الجهاز كقيمة مقسومة. في التأين الكهربائي الرشاشي الموجب، يمكن للببتيد أن يلتقط أكثر من بروتون واحد. شحنتان تقسمان كتلة الأيون على اثنين؛ وثلاث شحنات تقسمها على ثلاثة. يوضح مقدمة Thermo Fisher لماذا يُبلغ مطياف الكتلة عن قيم نسبة الكتلة إلى الشحنة بدلاً من وزن بسيط.
مثال محلول: 2,000 Da يصبح حوالي 1,001 m/z
خذ ببتيدًا افتراضيًا بكتلة متعادلة 2,000 Da. للأيونات الموجبة بالبروتونات فقط، استخدم m/z = (M + z × 1.0073) ÷ z، حيث M هي الكتلة المتعادلة و z هي الشحنة. الكتلة التقريبية للبروتون هي 1.0073 Da. عند شحنة +1، تكون النتيجة 2,001.0073؛ وعند +2، تكون 1,001.0073؛ وعند +3، تكون 667.6739.
هذه قيم تعليمية محسوبة، وليست نتائج اختبار NHD. وهي تصف ثلاث حالات شحنة للجزيء الافتراضي نفسه. الرقم الأصغر لا يعني أن سلسلة الببتيد انقسمت إلى نصفين.
اسأل عن الرقم الذي يعرضه التقرير
تحقق من تعيين الشحنة وما إذا كان التقرير يعطي m/z خامًا أو كتلة محايدة معاد بناؤها. اسأل أيضًا ما إذا كان يستخدم الكتلة أحادية النظير أو الكتلة المتوسطة. هاتان طريقتان مختلفتان لتلخيص النظائر. تحتاج إضافات الصوديوم وأشكال الأيونات الأخرى والشظايا إلى تفسير مختلف؛ فالصيغة البسيطة المعتمدة على البروتون فقط لا تغطيها.
تطابق الكتلة مفيد، لكنه ليس فحص الجودة الكامل
تدعم الكتلة المطابقة الهوية المقترحة. لكنها لا تثبت بحد ذاتها ترتيب التسلسل أو النقاء أو كمية الببتيد في المسحوق. استخدم نتيجة الكتلة جنبًا إلى جنب مع السجلات التحليلية المتفق عليها. لدينا دليل تحديد الهوية باستخدام تقنية LC–MS يشرح هذا التمييز.
هل تشتري مادة من الكتالوج مثل LL-37، أو تطلب تسلسلًا مخصصًا؟ أرسل إلى NHD المادة الدقيقة واسأل عن سجلات الهوية المتاحة. تأكد من النطاق قبل الطلب؛ هذا المثال لا يثبت هوية أي دفعة موردة.
لأغراض البحث المخبري فقط. غير مخصص للاستخدام البشري أو البيطري.
مراجع
المصادر ومنهج التحرير
كتابة بمساعدة الذكاء الاصطناعي، وفحص المصادر، وغلاف مصوّر.
ترد 2 من السجلات المرتبطة في المراجع أدناه. اقرأ سياسة التحرير والاستعانة بالذكاء الاصطناعي.
كيفية تفسير هذا المقال
الأمثلة هي حسابات، وليست نتائج دفعة NHD. تأكد من جدوى المشروع وتوافر المستندات.
حدود الاستخدام البحثي: مواد الكتالوج المذكورة في هذا الموقع مخصصة للبحث المخبري والتطوير والتصنيع فقط، وليست للاستخدام البشري أو البيطري. هذا المحتوى ليس نصيحة طبية ولا يقدم تعليمات للإعطاء.
السجلات الأولية والمصادر الموثوقة
- Thermo Fisher: نظرة عامة على مطياف الكتلةمرجع تقني؛ الأمثلة الرقمية التخطيطية هي حسابات أصلية.
- Thermo Fisher: تعيين الشحنة لبيانات الكتلة محلولة النظائرمرجع تقني؛ الأمثلة الرقمية التخطيطية هي حسابات أصلية.
