分析方法 · 基础教学

标准曲线怎么算浓度？从已知样品到未知样品

先用已知浓度建立对应关系，再从仪器信号算未知浓度。

NHD 技术团队3 张教学示意图资料核对：2026-10-11

仪器给了一个信号“6.2”，实验却要知道浓度，怎么换算？不能把 6.2 直接当成 μM。先测几份浓度已知的标准样品，看浓度和信号怎样对应，再用这个关系计算未知样品。这就是标准曲线的基本思路。

第一步：准备浓度已知的样品

本例准备 0、1、2、4、8 μM 的标准点。用选定的方法测量，把浓度放在横轴、信号放在纵轴。

这些浓度必须有可靠依据。标准液配错了，画出来的线再漂亮，也可能算错。标准样品与未知样品的处理和检测条件，也要有合适的可比性。

假设得到的关系是 y = 2x + 0.2。x 是浓度，单位为 μM；y 是仪器信号，采用本例的任意信号单位。浓度每增加 1 μM，信号增加 2；式子中的 0.2 是截距。

要从信号反算浓度，就反过来做：先减去 0.2，再除以 2。空白修正要按方法进行，不要先扣一次背景，又把同一次修正重复扣掉。

未知样品信号为 6.2，则 x =（6.2 − 0.2）÷ 2 = 3 μM。这个结果落在本例画出的 0–8 μM 范围内。

如果未知样品超出了方法已经确认能可靠测量的范围，不要把直线无限延长来猜结果。实验室可能需要适当稀释，或采用已确认适用的其它测量安排。

假设测量前把原样稀释了 5 倍，且没有损失。测到的那份溶液是 3 μM，原样则是 3 × 5 = 15 μM。

1 份原样加 4 份稀释液，总共是 5 份，所以稀释倍数为 5，不是 4。记录最终体积与原样取样体积，之后才容易检查。

不一定。R² 很高，说明数据与所拟合的线较吻合，却不能单独证明低浓度结果准确。还需要按方法检查重复测量、背景、回收和干扰等。

信号为 10.2，原样稀释了 3 倍，原样浓度是多少？

查看答案

测量液为（10.2 − 0.2）÷ 2 = 5 μM；原样为 5 × 3 = 15 μM。

需要对 KPV 或 LL-37 定量时，说明你是要测目标肽的含量，还是寻找检测方法需要的标准材料，再确认哪些资料可提供。普通目录产品，不能自动当作有证标准物质使用。