分析方法 · 基础教学
重标记多了 8 Da，质谱为什么只移动 4？
重标记增加的是分子质量；图上的位移还要看电荷数。
重标记写着增加约 8 Da，质谱图上却只差 4，是不是标记没做全？如果比较的是相对应的双电荷离子，这可能正是预期结果。我们从“重标记”是什么讲起，再把这个 8 和 4 联系起来。
“重标记”的重，来自哪里？
稳定同位素标记，是在明确的位置，用指定的较重同位素替换相应原子。它不是随便加上重金属。做标记时，序列、位置和同位素组成都要写清楚。
本文为了方便计算，假设增加恰好 8.0000 Da。真实标记的精确质量，要按实际同位素组成计算，不能直接照用这个整数。
为什么 8 Da 会变成横轴上的 4？
比较其它条件相对应的离子时，用分子质量差除以电荷数。单电荷移动 8；双电荷移动 4；三电荷约移动 2.6667。
分子增加的质量没有变，变的是横轴表示这个差值的方式。
先确认，比较的真是一对轻重峰
要比较电荷数和加合形式相对应的轻、重离子。不能拿轻肽的双电荷峰，与重肽的三电荷峰，直接套用这条差值公式。
同位素峰形和色谱信息可以帮助核对这对信号。不相关的峰也可能碰巧靠近，不能只因为差值接近，就认定是重标记峰。
有一个重峰，就能直接当定量内标吗？
内标，是加入检测体系、帮助比较信号的参考材料。要把重标记肽用于定量，不仅要知道它是什么，还要知道加入了多少，以及它在这个检测方法中表现怎样。
标记同位素的比例、未标记成分和处理过程中的回收情况，都可能影响结果。轻重峰的比值，要放在合适且经过校准的方法中，才能用于算浓度。
换一个差值，再算一次
真实订单里，要写完整序列、标记位置、同位素组成和两端基团。只写“重标记肽”，还不足以确定要做什么材料。
假设标记增加 10.0000 Da，对应双电荷离子移动多少？
查看答案
10.0000 ÷ 2 = 5.0000 m/z。
需要 MOTS-c 重标记材料，怎么提出需求？
如果研究需要 MOTS-c 重标记材料，把完整标记规格作为定制需求提交，确认能否制作及能提供哪些资料。普通目录里的 MOTS-c 页面，并不表示已有重标记变体或库存。