MÉTHODES ANALYTIQUES · GUIDE PRATIQUE
Un pic dans le blanc : comprendre le bruit de fond et le report LC–MS
Utilisez des injections à blanc pour distinguer un signal de fond d'un signal laissé par l'échantillon précédent.
Vous lancez un blanc, en vous attendant à une ligne plate, mais un pic apparaît. D'où vient-il ? Un blanc peut aider à répondre à cette question, surtout si vous savez ce qui a été injecté juste avant.
Un blanc passe tout de même dans le système
Un blanc contient normalement le solvant ou le milieu d'échantillon choisi, sans l'analyte cible. Il traverse tout de même l'instrument et peut révéler des signaux provenant du solvant, des récipients ou du système.
Définissez quel blanc a été utilisé. Un blanc de solvant et un blanc soumis à la préparation d'échantillon n'explorent pas exactement les mêmes sources.
Observez le blanc avant l'échantillon
Si un signal est déjà présent avant l'injection de l'échantillon cible, cet échantillon ne peut pas en être la seule explication. Recherchez un bruit de fond ou une contamination antérieure.
La comparaison doit utiliser le signal pertinent et la même méthode. Un pic à un temps similaire ne suffit pas à lui seul à identifier une substance chimique.
Regardez ensuite immédiatement après un échantillon fort
Un signal qui apparaît après un échantillon fort, puis diminue dans les blancs suivants, suggère que de la matière est peut-être restée dans l'instrument. C'est souvent appelé report de mémoire. La séquence est une preuve utile, mais la cause doit encore être étudiée.
Dans un exemple pédagogique, l'aire de l'échantillon est 100,000 et l'aire du blanc suivant est 100. Le rapport blanc-échantillon est 100 ÷ 100,000 × 100% = 0.1%.
Pourquoi un petit signal résiduel peut avoir de l'importance
Un petit signal par rapport à un échantillon concentré peut être important par rapport à l'échantillon suivant à faible concentration. Pensez à le comparer avec la mesure que vous êtes sur le point de faire, pas seulement avec le grand pic précédent.
Les étapes de lavage, les contrôles du système et les blancs répétés doivent suivre la méthode du laboratoire. Le calcul 0.1% présenté ici n'est pas une limite d'acceptation universelle.
Que peut réellement vous apprendre ce blanc ?
Conservez ensemble l'ordre d'injection, la méthode et les données de signal. Sans ce contexte, un pic de blanc est difficile à interpréter.
Voir la réponse
Non. Le signal était déjà présent avant cet échantillon. Étudiez aussi le bruit de fond et la séquence antérieure.
Lors de l'examen des signaux LL-37 ou MOTS-c
Pour les tests LL-37 ou MOTS-c, demandez si les blancs pertinents ont été inclus et où ils se situent dans l'ordre d'injection. Ces enregistrements aident à interpréter les signaux faibles ; un nom de produit seul ne peut pas les résoudre.
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