MÉTODOS ANALÍTICOS · GUIA PRÁTICO
Um Pico no Branco: Entenda o Fundo e o Carryover de LC–MS
Use injeções em branco para distinguir um sinal de fundo de um sinal deixado pela amostra anterior.
Você roda um branco, esperando uma linha reta, mas um pico aparece. De onde ele veio? Um branco pode ajudar a responder essa pergunta, especialmente se você sabe o que foi injetado imediatamente antes dele.
Um branco ainda passa pelo sistema
Um branco normalmente contém o solvente ou meio de amostra escolhido sem o analito alvo. Ele ainda percorre o instrumento e pode revelar sinais do solvente, dos recipientes ou do sistema.
Defina qual branco foi usado. Um branco de solvente e um branco submetido ao preparo de amostra não investigam exatamente as mesmas fontes.
Observe o branco antes da amostra
Se um sinal já está presente antes de a amostra alvo ser injetada, essa amostra não pode ser sua única explicação. Procure fundo ou contaminação anterior.
A comparação deve usar o sinal relevante e o mesmo método. Um pico em tempo semelhante sozinho não é suficiente para identificar uma substância química.
Então observe imediatamente após uma amostra forte
Um sinal que aparece após uma amostra forte e depois diminui nos brancos seguintes sugere que material pode ter permanecido no instrumento. Isso costuma ser chamado de carryover. A sequência é uma evidência útil, mas a causa ainda precisa ser investigada.
Em um exemplo didático, a área da amostra é 100,000 e a área do branco seguinte é 100. A razão branco/amostra é 100 ÷ 100,000 × 100% = 0.1%.
Por que um pequeno sinal residual pode importar
Um sinal pequeno em relação a uma amostra concentrada pode ser grande em relação à próxima amostra de baixa concentração. Pense em compará-lo com a medição que você está prestes a fazer, não apenas com o pico grande anterior.
Etapas de lavagem, verificações do sistema e brancos repetidos devem seguir o método do laboratório. O cálculo de 0.1% aqui não é um limite de aceitação universal.
O que este branco pode realmente lhe dizer?
Mantenha a ordem de injeção, o método e os dados de sinal juntos. Sem esse contexto, um pico de branco é difícil de interpretar.
Ver a resposta
Não. O sinal já estava presente antes desta amostra. Investigue também o background e a sequência anterior.
Ao examinar sinais de LL-37 ou MOTS-c
Para testes de LL-37 ou MOTS-c, pergunte se brancos relevantes foram incluídos e onde eles estão na ordem de injeção. Esses registros ajudam a interpretar sinais baixos; apenas o nome do produto não pode resolvê-los.
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