分析方法 · 基础教学
肽储备液怎么配?先算目标,再算重量和体积
先用目标浓度算重量,再分清“加了多少溶剂”和“最后有多少溶液”。
计划配 10 mL、浓度为 100 μM 的肽储备液,应该称多少?这不是简单的“往瓶里加一点水”。先把目标浓度、最终体积和分子量写出来,重量才能算清楚。下面的数字用于练习,实际用什么溶剂,需要根据具体肽确认。
先把三个数字写出来
储备液,就是先配好、之后再按需要稀释使用的溶液。本例的目标是 100 μM,最终体积为 10 mL,假设分子量为 2,000 g/mol。
为了让单位能相乘,先换一下:100 μM = 0.0001 mol/L;10 mL = 0.010 L。先把这两步写清楚,后面就不容易算错。

先算数量,再算重量
浓度乘以体积,得到需要多少 mol:0.0001 × 0.010 = 0.000001 mol。
再乘以分子量:0.000001 × 2,000 = 0.002 g,也就是 2 mg。因此,这个例子需要 2 mg 的目标肽。
0.0001 × 0.010 × 2,000 = 0.002 g = 2 mg

如果粉末里只有 80% 是目标肽呢?
假设有定量检测结果,确认目标肽占整份粉末重量的 80%。要得到 2 mg 目标肽,就需要 2 ÷ 0.80 = 2.5 mg 粉末。
这里的 80% 指“目标肽占粉末重量的比例”。如果你只有 HPLC 纯度 98% 的结果,不能直接拿 98% 来替代,因为色谱峰面积比例不等于粉末里的重量比例。

“配到 10 mL”,不等于“加入 10 mL”
上面的公式用的是最终溶液体积。如果只是向材料中加入 10 mL 溶剂,不能默认最终体积一定恰好是 10 mL。实际配制时,要按实验室的合适方法达到目标体积。
溶剂也不能仅凭这个算式决定。不同肽的溶解情况不同,使用前要确认材料的溶剂、操作和保存要求。
用一半体积,检查你是否理解了
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体积减半,所需目标肽也减半,为 1 mg。如果定量检测确认目标肽占粉末重量的 80%,则需要 1 ÷ 0.80 = 1.25 mg 粉末。
配制记录至少留下称取重量、分子量、最终体积、溶剂,以及有没有做含量调整。别人拿到记录,应当能把计算再做一遍。
准备 MOTS-c、SS-31 储备液前,先确认什么?
准备 MOTS-c 或 SS-31 储备液前,先确认具体规格和合适的溶剂,再了解数量信息是如何得到的。如果你需要精确的目标肽浓度,要询问有没有相应的定量资料,不能仅凭瓶上的毫克数或纯度百分比推算。


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