ANALYTISCHE METHODEN · PRAXISLEITFADEN
Einen Peptid-Stock vorbereiten: Masse und Endvolumen berechnen
Berechnen Sie die Menge, die Sie für eine Stammlösung benötigen, und verstehen Sie, warum das Endvolumen wichtig ist.
Sie möchten 10 mL einer 100 µM Peptid-Stammlösung. Wie viel Material benötigen Sie? Die Berechnung verwendet drei Zahlen: Konzentration, Endvolumen und Molekulargewicht. Lassen Sie uns diese durchgehen, bevor wir das Pulver und das Lösungsmittel besprechen.
Notieren Sie zuerst die drei Zahlen
Eine Stammlösung ist eine relativ konzentrierte Lösung, die für eine spätere Verdünnung hergestellt wird. In diesem Beispiel ist das Ziel 100 µM, das Endvolumen beträgt 10 mL und das Molekulargewicht ist 2,000 g/mol.
Rechnen Sie die Konzentration in mol/L um und das Volumen in Liter: 100 µM = 0.0001 mol/L; 10 mL = 0.010 L.

Berechnen Sie zuerst die Stoffmenge, dann die Masse
Multiplizieren Sie die Konzentration mit dem Volumen: 0.0001 × 0.010 = 0.000001 mol. Multiplizieren Sie diese Menge mit 2,000 g/mol: das Ergebnis ist 0.002 g, oder 2 mg.
Das Beispiel benötigt daher 2 mg der angegebenen Peptidform, bevor eine Korrektur für anderes Material im Pulver erfolgt.
0.0001 mol/L × 0.010 L × 2,000 g/mol = 0.002 g

Was, wenn nur 80% des Pulvers das Zielpeptid ist?
Angenommen, ein geeigneter quantitativer Test zeigt, dass das Zielpeptid 80% des Pulvergewichts ausmacht. Um 2 mg Zielpeptid zu erhalten, beträgt die Pulvermenge 2 ÷ 0.80 = 2.5 mg.
Dies erfordert einen gemessenen Massenanteil des Zielpeptids. Ein HPLC-Flächenreinheitsergebnis von 98% kann dafür nicht eingesetzt werden.

“Auf 10 mL auffüllen” bedeutet Endvolumen der Lösung
10 mL Lösungsmittel zuzugeben und eine Lösung auf 10 mL aufzufüllen beschreiben unterschiedliche Vorgänge. Die obige Berechnung verwendet das Endvolumen der Lösung. Befolgen Sie eine geeignete Herstellungsmethode, die dieses Volumen erreicht.
Vor der Zubereitung passende Lösungsmittel- und Handhabungsbedingungen für das exakte Material bestätigen. Diese Berechnung belegt keine Löslichkeit.
Die Berechnung mit einer kleineren Charge prüfen
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Das halbe Volumen benötigt die halbe Menge: 1 mg Zielpeptid. Wenn der gemessene Zielmassenanteil 80% beträgt, wäre die Pulvermenge 1.25 mg.
Die gewogene Masse, Molmasse, das Endvolumen, das Lösungsmittel und jede Gehaltskorrektur dokumentieren. Eine andere Person sollte die Berechnung ohne Raten nachvollziehen können.
Vor der Zubereitung eines MOTS-c- oder SS-31-Stocks
Für die Planung eines MOTS-c- oder SS-31-Stocks zuerst die exakte Materialform und ein geeignetes Lösungsmittel bestätigen. Fragen, welche Mengeninformationen für dieses Material verfügbar sind; nicht annehmen, dass das Etikett der Durchstechflasche ein gemessenes Ergebnis des Zielpeptidgehalts ist.
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