MÉTODOS ANALÍTICOS · GUÍA PRÁCTICA
Preparación de una solución madre de péptidos: calcular la masa y el volumen final
Calcula la cantidad que necesitas para una solución madre y comprende por qué importa el volumen final.
Quieres 10 mL de una solución madre de péptido 100 µM. ¿Cuánto material necesitas? El cálculo usa tres números: concentración, volumen final y peso molecular. Vamos a repasarlos antes de hablar del polvo y del disolvente.
Anota primero los tres números
Una solución madre es una solución relativamente concentrada que se prepara para diluirla después. En este ejemplo, el objetivo es 100 µM, el volumen final es 10 mL y el peso molecular es 2,000 g/mol.
Convierte la concentración a mol/L y el volumen a litros: 100 µM = 0.0001 mol/L; 10 mL = 0.010 L.

Calcula la cantidad molecular y luego la masa
Multiplica la concentración por el volumen: 0.0001 × 0.010 = 0.000001 mol. Multiplica esa cantidad por 2,000 g/mol: el resultado es 0.002 g, o 2 mg.
Por lo tanto, el ejemplo necesita 2 mg de la forma de péptido especificada, antes de cualquier corrección por otro material presente en el polvo.
0.0001 mol/L × 0.010 L × 2,000 g/mol = 0.002 g

¿Y si solo 80% del polvo es el péptido diana?
Supongamos que una prueba cuantitativa adecuada muestra que el péptido diana es 80% del peso del polvo. Para obtener 2 mg de péptido diana, la cantidad de polvo es 2 ÷ 0.80 = 2.5 mg.
Esto requiere una fracción másica de péptido diana medida. Un resultado de pureza por área de HPLC de 98% no puede sustituirlo.

“Enrasar hasta 10 mL” significa volumen final de disolución
Añadir 10 mL de disolvente y enrasar una disolución hasta 10 mL describen operaciones diferentes. El cálculo anterior usa el volumen final de disolución. Siga un método de preparación adecuado que alcance ese volumen.
Antes de la preparación, confirme un disolvente adecuado y las condiciones de manipulación para el material exacto. Esta aritmética no establece la solubilidad.
Verifique el cálculo con un lote más pequeño
Ver la respuesta
La mitad del volumen necesita la mitad de la cantidad: 1 mg de péptido diana. Si la fracción de masa de diana medida es 80%, la cantidad de polvo sería 1.25 mg.
Registre la masa pesada, el peso molecular, el volumen final, el disolvente y cualquier corrección de contenido. Otra persona debería poder seguir el cálculo sin adivinar.
Antes de preparar una solución madre de MOTS-c o SS-31
Para la planificación de soluciones madre de MOTS-c o SS-31, confirme primero la forma exacta del material y un disolvente adecuado. Pregunte qué información de cantidad está disponible para ese material; no asuma que la etiqueta del vial es un resultado medido del contenido de péptido diana.
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