Serial dilution

Plaques de dilution en série : garder le solvant final comparable

Utilisez un exemple de calcul de volume pour vérifier le DMSO final pour différentes concentrations de peptide, en complément de l’outil existant de planification des plaques.

Définir les conditions finales de chaque puits

Notez le volume final, la concentration de peptide cible et la composition finale du solvant. Une solution mère à forte teneur en DMSO ne détermine pas à elle seule la proportion finale, tandis qu’un petit ajout peut tout de même affecter un dosage. Incluez tous les volumes ajoutés dans le calcul.

Lire le plan de plaque hypothétique

La figure montre des concentrations de peptide de 0, 1 et 10 µM, avec un DMSO final de 0.1 % dans chaque groupe. Ce sont des conditions pédagogiques, et non des concentrations recommandées de KPV ou de LL-37. La valeur de 0.1 % n’est pas un niveau universellement sûr pour les cellules, les enzymes ou les systèmes de détection.

Une quantité plus importante de solution mère peut faire varier deux facteurs ensemble

Ajouter davantage de solution mère contenant DMSO au groupe à forte concentration de peptide sans équilibrer les autres groupes modifie à la fois le peptide et le solvant. Une différence observée a alors plus d’une cause possible. Concevez des solutions de travail et des témoins de véhicule appropriés avec des conditions finales comparables.

Vérifier un calcul de volume simple

Exemple pédagogique : un puits final de 100 µL reçoit 10 µL de solution de travail contenant 1 % de DMSO, sans DMSO dans les autres ajouts. La proportion finale est 10 × 1 % ÷ 100 = 0.1 %. Ce calcul simplifié de fraction volumique nécessite un volume final et une composition clairement définis ; il ne s’agit pas d’un protocole de dosage universel.

Un volume calculé doit aussi être pipettable

Si un transfert requis est inférieur à une plage de pipetage fiable, repensez la solution de travail ou les étapes de dilution et validez la méthode applicable. Un volume décimal mathématiquement valide ne garantit pas une manipulation pratique fiable.

Utiliser cette explication en complément de l’outil actuel

Planifiez les concentrations et les volumes avec l’outil existant, puis vérifiez séparément les proportions de solvant à chaque étape et pour chaque groupe. Cette mise à jour ajoute une explication et un exemple ; elle ne revendique pas de nouvelle fonction d’équilibrage automatique du solvant ni d’export. Les cartes associées prennent en charge les demandes de matériel.

Références

• Assay Guidance Manual

Les résultats publiés, les exemples pédagogiques hypothétiques et les informations sur les matériaux sont distingués. Lisez les méthodes originales avant de tenter une réplication.

Matériels de recherche associés

KPVConsultez les informations et spécifications sur les matériels, ou envoyez une demande de renseignements.LL-37Consultez les informations et spécifications sur les matériels, ou envoyez une demande de renseignements.

Se renseigner sur les produits et les informations →

Lecture de recherche et demandes de renseignements sur les matériels uniquement. Cette page n’est pas un avis médical personnel ni un substitut aux dossiers propres à chaque lot.