蛍光ペプチドは正しく標識されていても、機器がその標識をうまく励起または検出できない場合、期待外れのシグナルを生じることがあります。色を選ぶ前に、機器の光源とフィルターを確認してください。
蛍光標識には2つの有用な波長数値があります
励起は色素を刺激するために使用される光を表します。発光は色素が返す光を表します。Thermo FisherはAlexa Fluor 488の励起/発光極大を494/519 nm、Alexa Fluor 647の極大を650/668 nmと記載しています。これらはメーカーの色素参考値であり、NHDペプチドバッチからの測定値ではありません。周囲の化学的環境や測定条件がスペクトルに影響を与えることがあります。
色名は出発点にすぎません
“「緑」や「赤」は完全な光学設定を指定するものではありません。検出器には適切な発光ウィンドウも必要であり、光源は色素を十分に励起する必要があります。ピーク波長は厳密なカットオフではありません。色素はより広いスペクトルを持っています。色の言葉だけを照合するのではなく、実際の機器構成と色素情報を比較してください。
標識は物質を変化させることがあります
色素を結合すると化学基が追加され、予想される質量が変化します。結合位置とリンカーがある場合は注文仕様に含める必要があります。標識ペプチドがすべてのアッセイで非標識ペプチドとまったく同じ挙動をすると仮定しないでください。比較が重要な場合は、研究チームと非標識対照または他の適切な対照を計画してください。
見積もり依頼に添付するもの
配列、希望する色素、結合部位、必要に応じてリンカー、および装置モデルまたは励起/蛍光波長設定を提示してください。どの標識形態が実現可能か、またどのような純度および同一性の証拠が含まれるかを尋ねてください。関連する場合は、遊離色素または未標識ペプチドがどのように評価されるかも尋ねてください。一般的な「蛍光ペプチド」の見積もりを完全なものとして扱う前に、材料および分析範囲について合意してください。
NHDでの次のステップ
以下の関連製品カードは、カタログ上のペプチドファミリーを示しています。ビオチン化、蛍光標識、同位体標識、またはライブラリ版の入手可能性を確認するものではありません。修飾物質については、カスタムのお問い合わせで正確な設計を指定してください。
まずは 標識カスタムペプチドから始めてください。見積もりのご依頼は、 NHDまで配列または製品名、数量、必要な書類をお送りください。ご注文前に、正確な形態、実現可能性、利用可能な検査、納品条件をご確認ください。
出典
公開参考文献はこのトピックを説明するものであり、NHD バッチの証拠ではありません。研究用材料は実験室での研究、開発、製造用であり、ヒトまたは獣医学用ではありません。
この記事の解釈方法
公開データおよびラベル付き教育用計算であり、NHD バッチ結果ではありません。プロジェクトおよび文書の入手可能性をご確認ください。
研究用途の境界: このウェブサイトで取り上げるカタログ材料は、実験室の研究、開発、製造専用であり、ヒトまたは動物への使用を目的としません。本内容は医療助言ではなく、投与指示を提供しません。
一次記録と権威ある出典
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