Um experimento com peptídeos pode parecer convincente quando três poços dão quase o mesmo resultado. A próxima pergunta é se esses poços representam três testes separados do efeito biológico, ou três medições dentro de um único teste. Essa diferença muda o que o resultado pode sustentar.
Primeiro, diga o que foi repetido
Uma réplica técnica repete uma medição ou etapa de ensaio sob condições estreitamente compartilhadas. No exemplo de cultura celular discutido nas orientações da Nature, diferentes poços cultivados e testados juntos em uma placa são réplicas técnicas, não fontes biológicas distintas. Uma réplica biológica aborda a variação entre as unidades biológicas independentes especificadas pelo delineamento. Orientação da Nature sobre réplicas pede aos pesquisadores que distingam as duas e definam o que n significa.
Para o leitor, a pergunta útil é simples: esses resultados poderiam todos compartilhar o mesmo erro de preparação ou material biológico de partida? Se pudessem, números muito próximos não mostram, por si sós, que o efeito se repetirá com material independente.
Um exemplo de contagem: nove leituras, não automaticamente n = 9
Imagine um estudo com três execuções planejadas de forma independente e três poços em cada execução. Há 3 × 3 = 9 leituras de poços. As nove leituras estão aninhadas em três execuções. Elas não devem ser descritas como nove experimentos biológicos independentes só porque cada poço produziu um número.
| Execução | Leituras técnicas dos poços | O que reter |
|---|---|---|
| 1 | 3 | Todas as leituras mais o identificador da execução |
| 2 | 3 | Todas as leituras mais o identificador da execução |
| 3 | 3 | Todas as leituras mais o identificador da execução |
Este é um exemplo de contagem inventado, não dados de estudo nem um experimento NHD. Dias separados por si só não estabelecem independência biológica; a fonte celular, a preparação e o delineamento determinam a unidade experimental. Uma análise adequada deve levar em conta essa estrutura.
Verifique o rótulo ao lado de uma pequena barra de erro
Uma pequena barra de erro pode descrever a variação entre poços, em vez da variação entre experimentos independentes. Leia a legenda da figura antes de interpretá-la. Pergunte se a dispersão exibida é um desvio padrão, um erro padrão ou um intervalo de confiança, e se foi calculada no nível apropriado. Não selecione a descrição que faz o gráfico parecer mais certo.
Mantenha o registro do peptídeo junto ao experimento
Ao comparar experimentos LL-37 ou KPV, mantenha o composto exato, a forma fornecida, o identificador de lote se disponível, a base de quantidade, o meio de ensaio e as condições de controle. Alterar o material e o delineamento experimental ao mesmo tempo torna mais difícil identificar a origem de uma diferença.
Para compras de laboratório, consulte os LL-37 e KPV registros de catálogo. Escolha o material exigido pelo protocolo; o catálogo não é evidência de que um efeito experimental foi reproduzido. Envie uma consulta de pesquisa com a identidade, a base de quantidade e os registros de que você precisa.
Uma frase útil para uma seção de métodos
Informe o número de unidades independentes, o número de medições técnicas por unidade e como essas medições entraram na análise. Se um resultado é representativo de várias execuções, retenha também os dados das outras execuções. As princípios de relato pré-clínico dos NIH enfatizam o relato claro das repetições e do tamanho da amostra experimental.
Apenas material de pesquisa. Este guia explica o relato experimental e não fornece instruções de uso humano ou veterinário.
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