طرق تحليلية · دليل عملي
تسمية ثقيلة 8 Da لكن إزاحة m/z 4؟ الشحنة تفسر الفرق
تَتَبَّعْ تغير الكتلة الناتج عن الوسم الثقيل خلال حساب الشحنة.
تضيف العلامة حوالي 8 Da، لكن الطيف ينزاح بمقدار 4 فقط. قد يكون هذا بالضبط ما تتوقعه للأيونات المطابقة مزدوجة الشحنة. المفتاح هو أن محور مطياف الكتلة غالبًا ما يُظهر m/z بدلاً من الكتلة الجزيئية الكاملة.
ما الذي يجعل الببتيد الموسوم أثقل؟
يستبدل الوسم بالنظائر المستقرة ذرات مختارة بنظائر أثقل محددة في مواضع معينة. وهو لا يعني إرفاق معدن ثقيل غير محدد. يجب ذكر التسلسل ومواضع الوسم.
يستخدم هذا الدرس مثالًا مقربًا عن قصد بقيمة +8.0000 Da. يجب حساب الكتلة الدقيقة للوسم الحقيقي من تركيبه النظيري الفعلي.
لماذا يصبح 8 Da 4 على المحور
بالنسبة للأيونات المطابقة من حيث باقي الخصائص، اقسم فرق الكتلة الجزيئية على شحنتها. شحنة واحدة تعطي إزاحة m/z مقدارها 8؛ وشحنتان تعطيان 4؛ وثلاث تعطي حوالي 2.6667.
اكتسب الجزيء الكتلة نفسها. تغيرت فقط طريقة عرض المحور لهذا الفرق.
تأكد من أنك تقارن زوجًا
قارن الأيونات الخفيفة والثقيلة ذات الشحنة ونوع الإضافة المتطابقين. لا يمكن مقارنة قمة خفيفة ثنائية الشحنة وقمة ثقيلة ثلاثية الشحنة باستخدام صيغة الفرق البسيطة هذه.
يمكن أن يساعد نمط النظائر والمعلومات الكروماتوغرافية في التحقق من الاقتران. وإلا فقد تُخطئ في اعتبار قمة قريبة غير ذات صلة هي الشكل الثقيل.
لماذا لا تجعل القمة الثقيلة تلقائيًا معيارًا كميًا
المعيار الداخلي مادة تُضاف للمساعدة في مقارنة إشارات القياس. لاستخدام ببتيد موسوم بهذه الطريقة، تحتاج إلى معرفة هويته وكميته، وفحص كيفية سلوكه في الطريقة المختارة.
قد يكون إثراء الوسم والمواد غير الموسومة المتبقية واسترداد العينة مهمة. تحتاج نسبة الإشارة من الخفيف إلى الثقيل إلى طريقة معايرة مناسبة قبل أن تصبح نتيجة تركيز.
جرّب كتلة وسم مختلفة
للحصول على طلب حقيقي، حدّد التسلسل الكامل والمواقع الموسومة والتركيب النظائري والمجموعات الطرفية. عبارة “ببتيد ثقيل” وحدها ليست مواصفة كاملة.
عرض الإجابة
10.0000 ÷ 2 = 5.0000 m/z.
طلب تسلسل MOTS-c موسوم
إذا كان مشروعك يحتاج إلى تسلسل MOTS-c موسوم، فتقدّم بمواصفة الوسم الكاملة كطلب مخصص. سجل الكتالوج العادي لا يثبت توفر نسخة موسومة.
ناقش متطلبات المواد والمستندات مع NHD · تابع مع الدليل التحليلي