分析方法 · 基础教学
稀释肽时,DMSO 也被带进去了:最终比例怎么算
肽被稀释时,溶剂也一起进入实验体系;用体积把最终比例算清楚。
储备液很浓,实验时只加几微升。很容易觉得“这么一点溶剂,可以忽略吧”。但加入肽的同时,储备液里的 DMSO 也被带进去了。肽浓度和 DMSO 比例要分别计算,下面用同一次加样说明。
先算带进去了多少 DMSO
DMSO 是实验中有时会用到的溶剂。计算它的最终体积比例,可以分成两步:先算加入了多少 μL DMSO,再除以混合后的总体积。
如果储备液的溶剂是纯 DMSO,取 10 μL 就带入 10 μL DMSO。如果储备液只含 20% DMSO,就不能把这 10 μL 全部算成 DMSO。

先看纯 DMSO 的例子
假设储备液浓度为 1 mM,溶剂为纯 DMSO。取 10 μL,配到最终 1,000 μL。
肽浓度是:1,000 μM × 10 ÷ 1,000 = 10 μM。DMSO 的体积比例则是:10 ÷ 1,000 × 100% = 1%。
一个答案是 10 μM,另一个答案是 1%。它们描述的是同一份混合液,但分别在说肽有多浓、DMSO 占多少。
10 μL ÷ 1,000 μL × 100% = 1% DMSO

如果储备液只含 20% DMSO 呢?
仍然取 10 μL,但其中只有五分之一是 DMSO:10 × 20% = 2 μL。配到最终 1,000 μL 后,DMSO 比例就是 0.2%。
如果其它试剂也含 DMSO,要把各份试剂带入的 DMSO 先加起来,再除以最终体积。计算时用的是混合后的总体积,不是加样前那份液体的体积。
为什么需要溶剂对照?
如果不同实验孔加入的储备液体积不同,DMSO 比例也可能不同。观察到的变化,可能既与肽有关,也与溶剂有关。合适的溶剂对照可以帮助区分这两件事。
这里算出的 1% 和 0.2% 只是例题结果,不是推荐使用比例。某个比例能不能用于你的实验,要在相应研究体系中确认。

换个数字,再算一次
查看答案
带入 DMSO 为 5 × 40% = 2 μL;最终比例为 2 ÷ 1,000 × 100% = 0.2%。
记录里要写清储备液的溶剂组成和最终体积。只写“加了 5 μL 储备液”,别人还无法把这一步算出来。
准备 LL-37、SS-31 溶液时,别漏掉溶剂信息
了解 LL-37 或 SS-31 的溶液配制时,先确认所供材料适合什么溶剂,再计算这种溶剂会给最终体系带来多少。不要仅凭产品名称,就套用另一款肽的 DMSO 配制方式。
