MÉTHODES ANALYTIQUES · GUIDE PRATIQUE
Diluer une solution mère de peptide ? Calculez le pourcentage final de DMSO
Suivez la quantité de DMSO qui entre dans le mélange final lorsque vous diluez une solution mère de peptide.
Un petit ajout d'une solution mère de peptide concentrée ajoute aussi son solvant. Si la solution mère contient DMSO, vous devez suivre ce liquide ainsi que le peptide. Les deux calculs répondent à des questions différentes.
Comptez d'abord le volume de solvant
Le DMSO est un solvant parfois utilisé dans les solutions mères de recherche. Pour calculer son pourcentage volumique final, déterminez combien de microlitres de DMSO ont été ajoutés, puis divisez par le volume final du mélange.
Une solution mère préparée dans du DMSO pur apporte un microlitre de DMSO par microlitre transféré. Une solution mère contenant 20% DMSO en apporte moins.
Un exemple avec du DMSO pur
Supposons une solution mère de peptide à 1 mM dans du DMSO pur. Transférez 10 µL et complétez le mélange final jusqu'à 1,000 µL. La concentration de peptide est 1,000 µM × 10 ÷ 1,000 = 10 µM.
Le pourcentage de DMSO est 10 ÷ 1,000 × 100% = 1% en volume. Ces nombres décrivent le même mélange, mais l'un décrit la concentration de peptide et l'autre la proportion de solvant.
10 µL DMSO ÷ 1,000 µL volume final × 100% = 1%
Qu'est-ce qui change si la solution mère contient 20% DMSO ?
La même aliquote de 10 µL contient désormais 10 × 0.20 = 2 µL de DMSO. Dans un mélange final de 1,000 µL, cela représente 0.2% en volume.
Si plusieurs réactifs contiennent DMSO, additionnez toutes leurs contributions de DMSO avant de diviser par le volume final. Ne comptez pas uniquement la solution mère de peptide.
Pourquoi un contrôle solvant est important
Si les puits reçoivent des volumes de solution mère différents, leurs pourcentages de DMSO peuvent aussi différer. Un contrôle solvant approprié vous aide à étudier la contribution du solvant au lieu d'attribuer chaque changement au peptide.
Qu'un pourcentage particulier soit acceptable dépend du système de recherche. Les 1% et 0.2% ici sont des calculs, pas des limites recommandées.
Essayez une aliquote d'une solution mère en solvant mixte
Voir la réponse
L'aliquote contient 5 × 0.40 = 2 µL de DMSO. Le pourcentage final est 2 ÷ 1,000 × 100% = 0.2% en volume.
Écrivez la composition du solvant de la solution mère et le volume final à côté du calcul. Un volume de solution mère seul ne suffit pas pour le reproduire.
Vérifiez le solvant lors de la planification de travaux en LL-37 ou SS-31
Pour LL-37 ou SS-31, confirmez quel solvant convient au matériel fourni. Calculez ensuite ce que ce solvant apporte à votre mélange final prévu. Un nom de produit n'établit pas une méthode de préparation universelle en DMSO.
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