MÉTODOS ANALÍTICOS · GUÍA PRÁCTICA
¿Diluyes una solución madre de péptidos? Calcula el porcentaje final de DMSO
Haga un seguimiento de cuánto DMSO entra en la mezcla final cuando diluye una solución madre de péptido.
Una pequeña adición de una solución concentrada de péptido también añade su disolvente. Si la solución contiene DMSO, hay que tener en cuenta ese líquido además del péptido. Los dos cálculos responden a preguntas diferentes.
Primero calcula el volumen de disolvente
El DMSO es un disolvente que a veces se usa en soluciones madre de investigación. Para calcular su porcentaje en volumen final, halla cuántos microlitros de DMSO se añadieron y divídelo entre el volumen final de la mezcla.
Una solución madre preparada en DMSO puro aporta un microlitro de DMSO por cada microlitro transferido. Una solución madre que contiene 20% DMSO aporta menos.
Un ejemplo con DMSO puro
Supón una solución madre de péptido de 1 mM en DMSO puro. Transfiere 10 µL y completa la mezcla final hasta 1,000 µL. La concentración de péptido es 1,000 µM × 10 ÷ 1,000 = 10 µM.
El porcentaje de DMSO es 10 ÷ 1,000 × 100% = 1% en volumen. Estos números describen la misma mezcla, pero uno describe la concentración de péptido y el otro la proporción de disolvente.
10 µL DMSO ÷ 1,000 µL volumen final × 100% = 1%
¿Qué cambia si la solución madre contiene 20% DMSO?
La misma alícuota de 10 µL ahora contiene 10 × 0.20 = 2 µL de DMSO. En una mezcla final de 1,000 µL, eso es 0.2% por volumen.
Si varios reactivos contienen DMSO, suma todas sus contribuciones de DMSO antes de dividir por el volumen final. No cuentes solo la solución madre del péptido.
Por qué importa un control de disolvente
Si los pocillos reciben volúmenes diferentes de solución madre, sus porcentajes de DMSO también pueden diferir. Un control de disolvente adecuado te ayuda a investigar la contribución del disolvente en lugar de atribuir cada cambio al péptido.
Si un porcentaje concreto es aceptable depende del sistema de investigación. Los 1% y 0.2% aquí son cálculos, no límites recomendados.
Pruebe una alícuota de una disolución madre con disolvente mixto
Ver la respuesta
La alícuota contiene 5 × 0.40 = 2 µL de DMSO. El porcentaje final es 2 ÷ 1,000 × 100% = 0.2% por volumen.
Escriba la composición de disolvente de la disolución madre y el volumen final junto al cálculo. El volumen de la disolución madre por sí solo no basta para reproducirlo.
Compruebe el disolvente al planificar trabajo con LL-37 o SS-31
Para LL-37 o SS-31, confirme qué disolvente es adecuado para el material suministrado. Después calcule qué aporta ese disolvente a su mezcla final prevista. El nombre de un producto no establece un método de preparación universal para DMSO.
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