ANALYTISCHE METHODEN · PRAXISLEITFADEN
Peptid-Stammlösung verdünnen? Berechnen Sie den endgültigen DMSO-Prozentsatz
Verfolgen Sie, wie viel DMSO in die Endmischung gelangt, wenn Sie einen Peptid-Stammlösung verdünnen.
Ein kleiner Zusatz einer konzentrierten Peptid-Stammlösung bringt auch deren Lösungsmittel mit ein. Wenn die Stammlösung DMSO enthält, müssen Sie diese Flüssigkeit ebenso wie das Peptid berücksichtigen. Die beiden Berechnungen beantworten unterschiedliche Fragen.
Zuerst das Lösungsmittelvolumen berechnen
DMSO ist ein Lösungsmittel, das manchmal in Forschungs-Stammlösungen verwendet wird. Um seinen endgültigen Volumenprozentsatz zu berechnen, ermitteln Sie, wie viele Mikroliter DMSO zugesetzt wurden, und teilen Sie dann durch das endgültige Mischungsvolumen.
Eine Stammlösung in reinem DMSO trägt ein Mikroliter DMSO pro übertragenem Mikroliter bei. Eine Stammlösung, die 20% DMSO enthält, trägt weniger bei.
Ein Beispiel mit reinem DMSO
Angenommen, eine 1 mM Peptid-Stammlösung in reinem DMSO. Übertragen Sie 10 µL und füllen Sie die endgültige Mischung auf 1,000 µL auf. Die Peptidkonzentration ist 1,000 µM × 10 ÷ 1,000 = 10 µM.
Der DMSO-Prozentsatz ist 10 ÷ 1,000 × 100% = 1% nach Volumen. Diese Zahlen beschreiben dieselbe Mischung, aber die eine beschreibt die Peptidkonzentration und die andere den Lösungsmittelanteil.
10 µL DMSO ÷ 1,000 µL Endvolumen × 100% = 1%
Was ändert sich, wenn die Stammlösung 20% DMSO enthält?
Das gleiche 10 µL Aliquot enthält nun 10 × 0.20 = 2 µL an DMSO. In einer finalen 1,000 µL Mischung sind das 0.2% nach Volumen.
Wenn mehrere Reagenzien DMSO enthalten, addieren Sie alle ihre DMSO Beiträge, bevor Sie durch das Endvolumen dividieren. Zählen Sie nicht nur die Peptid-Stammlösung.
Warum eine Lösungsmittelkontrolle wichtig ist
Wenn Wells unterschiedliche Volumina der Stammlösung erhalten, können auch ihre DMSO Prozentsätze unterschiedlich sein. Eine geeignete Lösungsmittelkontrolle hilft Ihnen, den Beitrag des Lösungsmittels zu untersuchen, anstatt jede Veränderung dem Peptid zuzuschreiben.
Ob ein bestimmter Prozentsatz akzeptabel ist, hängt vom Forschungssystem ab. Die 1% und 0.2% hier sind Berechnungen, keine empfohlenen Grenzwerte.
Versuchen Sie einen Teil einer Stammlösung mit gemischtem Lösungsmittel
Antwort ansehen
Der Teil enthält 5 × 0.40 = 2 µL von DMSO. Der finale Prozentsatz ist 2 ÷ 1,000 × 100% = 0.2% nach Volumen.
Schreiben Sie die Lösungsmittelzusammensetzung der Stammlösung und das finale Volumen neben die Berechnung. Ein Stammlösungsvolumen allein reicht nicht aus, um sie zu reproduzieren.
Prüfen Sie das Lösungsmittel bei der Planung von LL-37- oder SS-31-Arbeiten
Bestätigen Sie für LL-37 oder SS-31, welches Lösungsmittel für das gelieferte Material geeignet ist. Berechnen Sie dann, was dieses Lösungsmittel zu Ihrer geplanten finalen Mischung beiträgt. Ein Produktname begründet keine universelle DMSO-Herstellungsmethode.
Besprechen Sie Material- und Dokumentanforderungen mit NHD · Weiter mit dem analytischen Leitfaden