طرق تحليلية · دليل عملي
هل تقوم بتخفيف محلول مخزون الببتيد؟ احسب النسبة المئوية النهائية لـ DMSO
تتبَّع مقدار DMSO الذي يدخل الخليط النهائي عند تخفيف محلول الببتيد الأساسي.
إضافة صغيرة من محلول مخزون ببتيد مركّز تضيف أيضًا مذيبه. إذا كان المخزون يحتوي على DMSO، فأنت بحاجة إلى تتبع ذلك السائل بالإضافة إلى الببتيد. الحسابان يجيبان عن سؤالين مختلفين.
احسب حجم المذيب أولاً
DMSO هو مذيب يُستخدم أحيانًا في المحاليل المخزونة البحثية. لحساب النسبة المئوية لحجمه النهائي، أوجد عدد الميكرولترات المضافة من DMSO، ثم اقسم على الحجم النهائي للمزيج.
المخزون المُحضَّر في DMSO النقي يساهم بميكرولتر واحد من DMSO لكل ميكرولتر يُنقل. المخزون الذي يحتوي على 20% DMSO يساهم بأقل من ذلك.

مثال باستخدام DMSO النقي
افترض محلولًا مخزونًا من الببتيد بتركيز 1 mM في DMSO النقي. انقل 10 µL واجعل الحجم النهائي للمزيج 1,000 µL. تركيز الببتيد هو 1,000 µM × 10 ÷ 1,000 = 10 µM.
النسبة المئوية لـ DMSO هي 10 ÷ 1,000 × 100% = 1% من حيث الحجم. تصف هذه الأرقام المزيج نفسه، لكن أحدها يصف تركيز الببتيد والآخر نسبة المذيب.
10 µL DMSO ÷ 1,000 µL الحجم النهائي × 100% = 1%

ما الذي يتغير إذا كان المحلول المخزّن يحتوي على 20% DMSO؟
الحجم المأخوذ نفسه 10 µL يحمل الآن 10 × 0.20 = 2 µL من DMSO. في خليط نهائي 1,000 µL، يمثل ذلك 0.2% من حيث الحجم.
إذا احتوت عدة كواشف على DMSO، فاجمع جميع إسهامات DMSO قبل القسمة على الحجم النهائي. لا تحسب محلول الببتيد المخزّن فقط.
لماذا يهم ضابط المذيب
إذا تلقت الآبار أحجامًا مختلفة من المحلول المخزّن، فقد تختلف نسب DMSO فيها أيضًا. يساعدك ضابط المذيب المناسب على استقصاء إسهام المذيب بدلًا من عزو كل تغيير إلى الببتيد.
تعتمد مقبولية نسبة معينة على نظام البحث. إن 1% و 0.2% هنا مجرد حسابات، وليست حدودًا موصى بها.

جرّب حجمًا مأخوذًا من محلول مخزون بمذيب مختلط
عرض الإجابة
يحتوي الحجم المأخوذ على 5 × 0.40 = 2 µL من DMSO. النسبة المئوية النهائية هي 2 ÷ 1,000 × 100% = 0.2% بالحجم.
اكتب تركيب مذيب المحلول المخزون والحجم النهائي بجانب الحساب. حجم المحلول المخزون وحده لا يكفي لإعادة إنتاجه.
تحقق من المذيب عند التخطيط لأعمال LL-37 أو SS-31
بالنسبة إلى LL-37 أو SS-31، تأكد من المذيب المناسب للمادة الموردة. ثم احسب ما يسهم به ذلك المذيب في المزيج النهائي المخطط له. اسم المنتج لا يثبت طريقة تحضير عالمية لـ DMSO.
ناقش متطلبات المواد والمستندات مع NHD · تابع مع الدليل التحليلي
