MÉTHODES ANALYTIQUES · GUIDE PRATIQUE
Préparer une solution mère de peptide : calculer la masse et le volume final
Calculez la quantité nécessaire pour une solution mère et comprenez pourquoi le volume final est important.
Vous souhaitez 10 mL d'une solution mère de peptide à 100 µM. De quelle quantité de matière avez-vous besoin ? Le calcul utilise trois nombres : la concentration, le volume final et la masse moléculaire. Examinons-les avant de parler de la poudre et du solvant.
Notez d'abord les trois nombres
Une solution mère est une solution relativement concentrée préparée pour être diluée plus tard. Dans cet exemple, la cible est 100 µM, le volume final est 10 mL et la masse moléculaire est 2,000 g/mol.
Convertissez la concentration en mol/L et le volume en litres : 100 µM = 0.0001 mol/L ; 10 mL = 0.010 L.
Calculez la quantité de matière, puis la masse
Multipliez la concentration par le volume : 0.0001 × 0.010 = 0.000001 mol. Multipliez cette quantité par 2,000 g/mol : le résultat est 0.002 g, soit 2 mg.
L'exemple nécessite donc 2 mg de la forme peptidique spécifiée, avant toute correction pour les autres matières présentes dans la poudre.
0.0001 mol/L × 0.010 L × 2,000 g/mol = 0.002 g
Et si seulement 80% de la poudre est le peptide cible ?
Supposons qu'un test quantitatif approprié montre que le peptide cible représente 80% de la masse de la poudre. Pour obtenir 2 mg de peptide cible, la quantité de poudre est 2 ÷ 0.80 = 2.5 mg.
Cela nécessite une fraction massique de peptide cible mesurée. Un résultat de pureté surfacique HPLC de 98% ne peut pas le remplacer.
“ Compléter jusqu'à 10 mL ” désigne le volume final de solution
Ajouter 10 mL de solvant et compléter une solution jusqu'à 10 mL décrivent des opérations différentes. Le calcul ci-dessus utilise le volume final de solution. Suivez une méthode de préparation appropriée qui atteint ce volume.
Avant toute préparation, confirmez un solvant adapté et des conditions de manipulation pour le matériau exact. Cette arithmétique n'établit pas la solubilité.
Vérifiez le calcul avec une plus petite quantité
Voir la réponse
La moitié du volume nécessite la moitié de la quantité : 1 mg de peptide cible. Si la fraction massique mesurée du produit cible est 80%, la quantité de poudre serait 1.25 mg.
Notez la masse pesée, la masse moléculaire, le volume final, le solvant et toute correction de contenu. Une autre personne doit pouvoir suivre le calcul sans deviner.
Avant de préparer une solution mère de MOTS-c ou SS-31
Pour la planification d'une solution mère de MOTS-c ou SS-31, confirmez d'abord la forme exacte du matériau et un solvant adapté. Demandez quelles informations de quantité sont disponibles pour ce matériau ; ne supposez pas que l'étiquette du flacon constitue un résultat mesuré de contenu en peptide cible.
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