Por que os picos do espectro de massa formam um aglomerado: espaçamento isotópico e carga

Vários picos próximos aparecem no espectro. Eles são várias impurezas? Podem, em vez disso, ser um aglomerado de isótopos de um tipo de molécula. O espaçamento pode ajudar a explicar a carga do íon.

O mesmo elemento pode ter massas ligeiramente diferentes

Átomos do mesmo elemento podem ter números diferentes de nêutrons. Essas versões são chamadas de isótopos. Uma molécula que contém um isótopo mais pesado tem uma massa ligeiramente diferente, mesmo quando sua sequência de peptídeos não mudou.

Os peptídeos contêm muitos átomos, então uma amostra pode dar um grupo de sinais de isótopos próximos em vez de uma única linha. Os padrões reais dependem dos elementos e das combinações de isótopos presentes.

Por que mais carga comprime os intervalos

O eixo é m/z: massa do íon dividida pela carga. Usando uma aproximação comum de espaçamento de isótopo de carbono de 1.00335 Da, um grupo de carga única tem intervalos próximos de 1.00335 m/z. Com duas cargas, os intervalos ficam próximos de 0.50168; com três, próximos de 0.33445.

A diferença de massa é dividida por um número maior. É por isso que os picos ficam mais próximos neste eixo.

Leia a escala, não apenas a forma

Dê zoom em um agrupamento claramente resolvido e subtraia as posições dos picos adjacentes. Um intervalo próximo de 0.50 m/z sugere duas cargas neste modelo. Um intervalo próximo de 0.33 sugere três.

Isso só funciona se você estiver comparando picos do mesmo agrupamento. Agrupamentos sobrepostos ou resolução insuficiente podem tornar a estimativa enganosa.

Converta m/z de volta em massa molecular

Suponha que o íon seja confirmado como [M+2H]2+ e seu m/z seja 501.0073. Multiplique por dois e então subtraia a massa dos dois prótons adicionados: 2 × 501.0073 − 2 × 1.007276 ≈ 1,000.0000 Da.

O espaçamento ajuda a estimar a carga, mas não estabelece por si só o tipo de aducto. Verifique a fórmula do íon antes de usar este cálculo.

Tente ler um agrupamento de três cargas

Um agrupamento convincente pode ajudar a interpretar o sinal de massa. Ele não mede a atividade do peptídeo nem estabelece cada posição na sequência.

Verificando gráficos de MOTS-c e SS-31

Para espectros de MOTS-c ou SS-31, pergunte quais agrupamentos isotópicos e estados de carga apoiam a massa molecular relatada. Mantenha o espectro anotado junto com o cálculo.

MOTS-c / SS-31

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