ANALYTISCHE METHODEN · PRAXISLEITFADEN
Zusätzliche Massenspektrum-Peaks: Natrium- und Kalium-Addukte erklärt
Ein zusätzlicher Peak kann ein anderes Ion desselben Moleküls sein. Erfahren Sie, was ein Addukt ist.
Ein Massenspektrum hat einen zweiten Peak etwa 22 Einheiten über dem ersten. Hat das Peptid eine Verunreinigung aufgenommen? Eine mögliche Erklärung ist ein Natriumaddukt: Dasselbe Molekül hat ein anderes Ion gebildet. Wir verwenden ein einfaches Beispiel, um den Unterschied zu sehen.
Das Instrument detektiert Ionen
In einem Positivionenspektrum kann ein Molekül ein Ion bilden, indem es ein Proton aufnimmt. Wir schreiben das als [M+H]+, wobei M das neutrale Molekül darstellt. Es kann auch [M+Na]+ oder [M+K]+ mit Natrium oder Kalium bilden.
Diese Signale können verschiedene Ionen desselben Moleküls darstellen, statt drei verschiedener Peptidsequenzen.
Berechnen Sie drei einfach geladene Signale
Für eine didaktische neutrale Masse von 1,000.0000 Da sind die ungefähren m/z-Werte 1,001.0073 für [M+H]+, 1,022.9892 für [M+Na]+ und 1,038.9632 für [M+K]+.
Das Natriumsignal liegt etwa 21.9819 über dem Protonensignal. Das Kaliumsignal liegt etwa 37.9559 darüber. Jede Differenz vergleicht zwei zueinander passende einfach geladene Ionen.
Warum die Ladung den scheinbaren Abstand verändert
Die horizontale Achse ist m/z: Masse geteilt durch Ladung. Wenn Natrium ein Proton in ansonsten übereinstimmenden doppelt geladenen Ionen ersetzt, beträgt der Abstand etwa 21.9819 ÷ 2 = 10.9910 m/z.
Bevor Sie einen erwarteten Abstand verwenden, prüfen Sie die Ladung und die tatsächlichen Ionenformeln. Vergleichen Sie nicht einfach unzusammenhängende Peaks, nur weil ihr Abstand vertraut aussieht.
Ein plausibler Abstand ist ein Hinweis, keine endgültige Antwort
Prüfen Sie das gesamte Muster, die Isotopencluster und den chromatographischen Bereich, in dem die Signale auftreten. Hintergrundsignale oder ein anderes Molekül können das Bild verkomplizieren.
Die Addition der Höhen dieser Ionen ergibt keinen HPLC-Reinheitsprozentsatz. Es sind unterschiedliche Messgrößen.
Prüfe die Ladung, bevor du rechnest
Ein nützlicher Bericht benennt die vorgeschlagenen Ionen, anstatt den Leser allein anhand der Peak-Abstände raten zu lassen.
Antwort ansehen
Etwa 10.9910 m/z. Diese Berechnung setzt diesen spezifischen Ersatz und eine Ladung von zwei voraus.
Auswertung von KPV- oder MOTS-c-Spektren
Frage bei KPV- oder MOTS-c-Spektren, welche Peaks dem Zielmolekül zugeordnet wurden und welche Addukte berücksichtigt wurden. Ein zusätzlicher Peak braucht eine Erklärung, ist aber nicht automatisch eine neue Verunreinigung.
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MOTS-c (Human)
SS-31 (Elamipretide)