MÉTHODES ANALYTIQUES · GUIDE PRATIQUE
Pics supplémentaires dans le spectre de masse : explication des adduits sodium et potassium
Un pic supplémentaire peut être un autre ion de la même molécule. Découvrez ce qu'est un adduit.
Un spectre de masse présente un second pic environ 22 unités au-dessus du premier. Le peptide a-t-il gagné une impureté ? Une explication possible est un adduit de sodium : la même molécule a formé un ion différent. Nous allons utiliser un exemple simple pour voir la différence.
L'appareil détecte les ions
Dans un spectre en mode ions positifs, une molécule peut former un ion en gagnant un proton. On l'écrit [M+H]+, où M représente la molécule neutre. Elle peut aussi former [M+Na]+ ou [M+K]+ avec le sodium ou le potassium.
Ces signaux peuvent représenter différents ions d'une même molécule, plutôt que trois séquences peptidiques différentes.
Calculer trois signaux à charge unique
Pour une masse neutre pédagogique de 1,000.0000 Da, les valeurs m/z approximatives sont 1,001.0073 pour [M+H]+, 1,022.9892 pour [M+Na]+ et 1,038.9632 pour [M+K]+.
Le signal du sodium est environ 21.9819 au-dessus du signal du proton. Le signal du potassium est environ 37.9559 au-dessus. Chaque différence compare deux ions à charge unique correspondants.
Pourquoi la charge modifie l'écart apparent
L'axe horizontal est m/z : la masse divisée par la charge. Si le sodium remplace un proton dans des ions double charge par ailleurs identiques, l'écart est d'environ 21.9819 ÷ 2 = 10.9910 m/z.
Avant d'utiliser un écart attendu, vérifiez la charge et les formules ioniques réelles. Ne comparez pas des pics sans lien simplement parce que leur espacement semble familier.
Un écart plausible est un indice, pas une réponse définitive
Vérifiez le profil complet, les grappes isotopiques et la région chromatographique où les signaux apparaissent. Les signaux de fond ou une autre molécule peuvent compliquer la situation.
Additionner les hauteurs de ces ions ne donne pas un pourcentage de pureté HPLC. Ce sont des mesures différentes.
Vérifiez la charge avant de calculer
Un rapport utile nomme les ions proposés au lieu de laisser le lecteur deviner à partir du seul espacement des pics.
Voir la réponse
Environ 10.9910 m/z. Ce calcul suppose ce remplacement précis et une charge de deux.
Lecture de spectres KPV ou MOTS-c
Pour les spectres KPV ou MOTS-c, demandez quels pics ont été attribués à la molécule cible et quels adduits ont été pris en compte. Un pic supplémentaire nécessite une explication, mais il ne s'agit pas automatiquement d'une nouvelle impureté.
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MOTS-c (Human)
SS-31 (Elamipretide)