MÉTODOS ANALÍTICOS · GUÍA PRÁCTICA
Picos adicionales en el espectro de masas: explicación de los aductos de sodio y potasio
Un pico adicional puede ser otro ion de la misma molécula. Aprende qué es un aducto.
Un espectro de masas tiene un segundo pico aproximadamente 22 unidades por encima del primero. ¿Ha adquirido el péptido una impureza? Una posible explicación es un aducto de sodio: la misma molécula ha formado un ion diferente. Usaremos un ejemplo sencillo para ver la diferencia.
El instrumento detecta iones
En un espectro de iones positivos, una molécula puede formar un ion al ganar un protón. Esto se escribe como [M+H]+, donde M representa la molécula neutra. También puede formar [M+Na]+ o [M+K]+ con sodio o potasio.
Estas señales pueden representar iones diferentes de la misma molécula, en lugar de tres secuencias peptídicas diferentes.
Calcular tres señales de carga única
Para una masa neutra didáctica de 1,000.0000 Da, los valores aproximados de m/z son 1,001.0073 para [M+H]+, 1,022.9892 para [M+Na]+ y 1,038.9632 para [M+K]+.
La señal de sodio está aproximadamente 21.9819 por encima de la señal de protón. La señal de potasio está aproximadamente 37.9559 por encima de ella. Cada diferencia compara dos iones correspondientes de carga única.
Por qué la carga cambia la separación aparente
El eje horizontal es m/z: masa dividida por carga. Si el sodio reemplaza a un protón en iones de doble carga que por lo demás coinciden, la separación es aproximadamente 21.9819 ÷ 2 = 10.9910 m/z.
Antes de usar una separación esperada, compruebe la carga y las fórmulas iónicas reales. No compare picos no relacionados solo porque su espaciado parezca familiar.
Una separación plausible es una pista, no una respuesta final
Compruebe el patrón completo, los grupos de isótopos y la región cromatográfica en la que aparecen las señales. Las señales de fondo u otra molécula pueden complicar el panorama.
Sumar las alturas de estos iones no da un porcentaje de pureza HPLC. Son mediciones diferentes.
Compruebe la carga antes de calcular
Un informe útil nombra los iones propuestos en lugar de dejar que el lector lo adivine solo por el espaciado de los picos.
Ver la respuesta
Aproximadamente 10.9910 m/z. Este cálculo asume esa sustitución específica y una carga de dos.
Lectura de espectros KPV o MOTS-c
Para los espectros KPV o MOTS-c, pregunte qué picos se asignaron a la molécula diana y qué aductos se consideraron. Un pico adicional necesita una explicación, pero no es automáticamente una nueva impureza.
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MOTS-c (Human)
SS-31 (Elamipretide)