Vous ajoutez une quantité connue de la substance cible dans un échantillon, et la quantité supplémentaire mesurée correspond-elle à la quantité ajoutée ? C'est la question que pose souvent l'essai de récupération par ajout dosé. Il aide à évaluer une méthode, mais ce n'est pas un bouton qui « corrige automatiquement » chaque échantillon.
Comprendre d'abord ce que l'on ajoute lors de l'ajout dosé
L'ajout dosé consiste généralement à introduire dans l'échantillon un matériau de référence dont l'identité et la valeur sont clairement établies, puis à le soumettre au traitement et à la détection prévus. Ce que l'on ajoute est une substance cible connue, pas une matière première quelconque trouvée sous le même nom. L'expérience doit connaître la base de teneur du matériau de référence, la quantité ajoutée et le moment de l'ajout. Des matrices et des niveaux de concentration différents peuvent se comporter différemment ; on ne peut pas généraliser à tous les échantillons un résultat obtenu dans une seule condition.
Ce qui est le plus souvent oublié, c'est la quantité déjà présente dans l'échantillon original
Supposons que l'échantillon non enrichi mesure 10.0 μg, que l'échantillon enrichi mesure 14.5 μg, que la quantité de référence ajoutée à l'échantillon correspondant soit de 5.0 μg, et que tous les résultats soient déjà convertis sur une même base comparable. Taux de récupération = (14.5 − 10.0) ÷ 5.0 × 100 % = 90 %. Si l'on divise directement 14.5 par 5.0, on inclut dans la « récupération » la substance cible déjà présente dans l'échantillon original. Ces trois nombres sont des hypothèses pédagogiques, pas des données réelles d'un lot.
Exemple de calcul pédagogique : soustraire d'abord l'échantillon original, puis diviser par la quantité ajoutée
- Non enrichi / après enrichissement: 10.0 μg / 14.5 μg (base unifiée)
- Ajout supplémentaire: 5.0 μg
- Taux de récupération par ajout dosé: (14.5 − 10.0) ÷ 5.0 × 100 % = 90 %
Ajouter une solution peut aussi modifier le dénominateur et le volume
Si l'on exprime les résultats en concentration, l'ajout d'une solution étalon modifie le volume, et la relation de dilution entre l'échantillon original et l'échantillon enrichi doit être traitée conjointement. On peut d'abord tout convertir en masse de l'échantillon correspondant, puis faire la comparaison ci-dessus ; on peut aussi utiliser une correction de concentration et de volume validée. Sans relevé du volume final, un simple jeu de concentrations peut ne pas suffire au calcul. Il faut aussi vérifier dès la conception si l'échantillon témoin doit recevoir la même quantité de solvant blanc.
Le moment de l'ajout détermine les étapes couvertes
Si l'ajout a lieu avant l'extraction, le résultat peut inclure l'effet d'un plus grand nombre d'étapes de préparation ; s'il a lieu après l'extraction, on ne peut pas en déduire que l'extraction précédente n'a pas perdu de matière. Pour des matériaux dont l'état chimique compte, comme le GHK-Cu, il faut aussi vérifier si la référence ajoutée correspond à l'objet à mesurer et si le traitement a modifié l'état mesuré. Un chiffre de récupération ne répond pas automatiquement à ces questions d'identité.
Un taux de 90 % est-il acceptable ? Cela dépend d'abord de l'usage
Cet article ne fixe pas de plage d'acceptation uniforme. L'évaluation doit tenir compte de l'usage de la méthode, du niveau de concentration, de la répétabilité et de critères définis à l'avance. Si la récupération est anormale, vérifiez d'abord le matériau étalon, le volume, les interférences de matrice, les pertes lors de la préparation et la réponse de l'instrument ; ne divisez pas directement tous les résultats par 0.90 en déclarant ensuite avoir obtenu la teneur réelle. La correction éventuelle et sa modalité doivent s'appuyer sur la base méthodologique correspondante. [1]
Rédiger les résultats pour qu'un autre puisse les recalculer
Notez le résultat non enrichi, le résultat après enrichissement, la quantité ajoutée connue, le traitement des volumes, le moment de l'ajout et la formule de calcul. Lors de l'envoi de matériaux comme le glutathion ou le GHK-Cu pour analyse, on peut préciser si l'on s'intéresse surtout au biais de quantification ou à la récupération d'une étape donnée, et faire confirmer la conception par le laboratoire. Les matériaux de catalogue ne sont pas des étalons naturellement qualifiés pour l'attribution de valeurs ; l'usage des matériaux de référence et celui des matériaux de recherche ordinaires doivent être confirmés séparément.
Sources originales
Vérifiez séparément les conditions de l’étude et les documents du matériau. Les calculs pédagogiques ne sont pas des résultats d’analyse de lot.
Glutathione
GHK-Cu
