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Diluindo um Estoque de Peptídeo? Calcule a Porcentagem Final de DMSO
Acompanhe quanto DMSO entra na mistura final quando você dilui um estoque de peptídeo.
Uma pequena adição de um estoque concentrado de peptídeo também adiciona seu solvente. Se o estoque contém DMSO, você precisa acompanhar esse líquido, assim como o peptídeo. Os dois cálculos respondem a perguntas diferentes.
Conte primeiro o volume do solvente
DMSO é um solvente às vezes usado em soluções estoque de pesquisa. Para calcular sua porcentagem de volume final, descubra quantos microlitros de DMSO foram adicionados e depois divida pelo volume final da mistura.
Um estoque feito em DMSO puro contribui com um microlitro de DMSO por microlitro transferido. Um estoque contendo 20% DMSO contribui menos.
Um exemplo com DMSO puro
Suponha um estoque de peptídeo de 1 mM em DMSO puro. Transfira 10 µL e complete a mistura final até 1,000 µL. A concentração de peptídeo é 1,000 µM × 10 ÷ 1,000 = 10 µM.
A porcentagem de DMSO é 10 ÷ 1,000 × 100% = 1% por volume. Esses números descrevem a mesma mistura, mas um descreve a concentração de peptídeo e o outro a proporção de solvente.
10 µL DMSO ÷ 1,000 µL volume final × 100% = 1%
O que muda se o estoque contiver 20% DMSO?
A mesma alíquota de 10 µL agora carrega 10 × 0.20 = 2 µL de DMSO. Em uma mistura final de 1,000 µL, isso é 0.2% por volume.
Se vários reagentes contiverem DMSO, some todas as suas contribuições de DMSO antes de dividir pelo volume final. Não conte apenas o estoque de peptídeo.
Por que um controle de solvente é importante
Se os poços receberem volumes diferentes de estoque, suas porcentagens de DMSO também podem diferir. Um controle de solvente adequado ajuda a investigar a contribuição do solvente em vez de atribuir toda mudança ao peptídeo.
Se uma porcentagem específica é aceitável depende do sistema de pesquisa. Os 1% e 0.2% aqui são cálculos, não limites recomendados.
Tente uma alíquota de um estoque em solvente misto
Ver a resposta
A alíquota contém 5 × 0.40 = 2 µL de DMSO. A porcentagem final é 2 ÷ 1,000 × 100% = 0.2% por volume.
Escreva a composição do solvente do estoque e o volume final ao lado do cálculo. Apenas o volume do estoque não é suficiente para reproduzi-lo.
Verifique o solvente ao planejar trabalho com LL-37 ou SS-31
Para LL-37 ou SS-31, confirme qual solvente é adequado para o material fornecido. Depois, calcule o que esse solvente contribui para a mistura final planejada. O nome de um produto não estabelece um método universal de preparação de DMSO.
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