طرق تحليلية · دليل عملي
خطأ كتلة الببتيد: لماذا يمكن أن تعني 0.01 Da قيم ppm مختلفة
حوّل فرق الكتلة إلى ppm، ثم تحقق من الكتل التي تمت مقارنتها.
الكتلة المقاسة أعلى من الكتلة المتوقعة بمقدار 0.01 Da. هل هذا قريب؟ يعتمد ذلك على حجم الجزيء. تعبر ppm عن الفرق نسبةً إلى الكتلة المتوقعة، وليس بالدالتون فقط.
Da يعطي الفرق؛ ppm يعطي نسبته
Da، أو الدالتون، هو وحدة كتلة جزيئية. الفرق بمقدار 0.01 Da هو فرق مطلق. ppm تعني جزء في المليون: هنا تصف فرق الكتلة ككسر من الكتلة المرجعية، مضروبًا في مليون.
الصيغة هي: خطأ ppm = (الكتلة المقاسة − الكتلة المرجعية) ÷ الكتلة المرجعية × 1,000,000.
اعمل على مثال 1,000 Da
المرجع هو 1,000.0000 Da والقيمة المقاسة هي 1,000.0100 Da. الطرح يعطي +0.0100 Da. اقسم على 1,000 واضرب في مليون: +10 ppm.
علامة الزائد تعني أن القياس أعلى. القيمة المقاسة 999.9900 Da ستعطي بدلاً من ذلك −10 ppm.
استخدم الفرق نفسه مع جزيء أثقل
عند كتلة مرجعية مقدارها 5,000 Da، يكون فرق +0.01 Da مساويًا +2 جزء في المليون. يشغل الفرق المطلق نفسه حصة أصغر من كتلة الجزيء الأكبر.
لهذا السبب تكون عبارة “تختلف الكتلتان بمقدار 0.01 Da” غير كاملة عندما تريد مقارنة الأخطاء النسبية.
تأكد من طرح المتماثل من المتماثل
غالبًا ما يُظهر محور مطياف الكتلة m/z، أي كتلة الأيون مقسومة على الشحنة. لا تطرح ذلك مباشرة من كتلة جزيئية متعادلة. تحقق أيضًا مما إذا كان المرجع يستخدم الكتلة أحادية النظير أو الكتلة المتوسطة؛ فهاتان طريقتان مختلفتان لوصف الكتلة الجزيئية.
يجب أيضًا أن تتطابق صيغة الناتج المتوقعة والتعديلات وإسناد الأيون. الخطأ الصغير يدعم تطابق الكتلة لكنه لا يثبت التسلسل الكامل أو النشاط الحيوي.
جرّب زوجًا آخر من القيم
احتفظ بعدد كافٍ من المنازل العشرية أثناء الحساب، ثم قرّب النتيجة النهائية. ما إذا كان ذلك مقبولًا يعتمد على الطريقة والسؤال قيد الاختبار.
عرض الإجابة
+0.0060 ÷ 2,000 × 1,000,000 = +3 جزء في المليون.
التحقق من نتيجة كتلة MOTS-c أو SS-31
بالنسبة إلى MOTS-c أو SS-31، استخدم الكتلة المرجعية للشكل الدقيق المقدَّم. اسأل عن نوع الكتلة والأيونات المستخدمة في المقارنة، بحيث يبدأ حساب ppm من قيم متطابقة.
ناقش متطلبات المواد والمستندات مع NHD · تابع مع الدليل التحليلي